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ECL發(fā)光Marker II(22-154 kD)

ECL發(fā)光Marker II(22-154 kD)

產(chǎn)品編號:RTD6129

產(chǎn)品規(guī)格:20次

數(shù)量
價格 ¥300

 ECL發(fā)光Marker II22-154 kD

 

產(chǎn)品編號及規(guī)格:

RTD6129   20T(100μl)

儲存條件:

  -20保存,開封后有效期12個月

產(chǎn)品簡介:

   ECL發(fā)光Marker是一種新型可視的 Western Blot(蛋白免疫印跡法)蛋白標(biāo)準(zhǔn),可在同一膜上實現(xiàn)與目的蛋白同時顯示,而無需任何附加步驟和額外的試劑。該產(chǎn)品由8 種高純度的重組蛋白和2 種預(yù)染重組蛋白組成,指示的蛋白質(zhì)分子量大小為12-154 kD(~12、22、28、38、50、62、~70、78、113、154  kD),其中~70 kD 為橙紅色預(yù)染條帶,~12 kD 為藍色預(yù)染條帶,方便動態(tài)觀察蛋白質(zhì)電泳狀態(tài)或判斷蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)膜效果。22、28、38、50、62、78、113、154  kD 等8 種重組蛋白可以結(jié)合幾乎所有類型抗體,可與目的蛋白質(zhì)同時結(jié)合抗體并經(jīng)ECL顯色。該產(chǎn)品為即用型,冰浴融解后即可使用。



使用說明:

1.ECL發(fā)光Marker徹底溶解后,混勻上樣(3-5 μl);

注a:對于使用一抗為鼠源抗體建議取本產(chǎn)品5 μl進行蛋白電泳;對于使用一抗為兔源抗體可以降低上樣量至3 μl;建議初次使用本產(chǎn)品時可以根據(jù)自身的實驗條件和實驗習(xí)慣通過預(yù)實驗確定合適的上樣量,以獲得效果更佳的實驗圖片;

注b:Marker為即用型,不能100℃加熱處理,否則會導(dǎo)致蛋白條帶發(fā)生降解或失去效果

2.待測蛋白樣品上樣;

3.常規(guī)聚丙烯酰胺凝膠電泳;

4.參照具體儀器說明,將蛋白轉(zhuǎn)移至合適的膜上;

5.參照目的蛋白抗體說明書,進行膜封閉、一抗孵育、二抗孵育及相應(yīng)的膜洗滌;

6.化學(xué)發(fā)光檢測,具體方法參照相關(guān)產(chǎn)品說明。

問題及解決:

ECL發(fā)光 Marker 的使用規(guī)范及其使用范圍請詳細閱讀上文,下表列出了實驗中可能出現(xiàn)的問題及相應(yīng)的解決方法,敬請參考:

問題

原因

解決方法

條帶弱或者沒有條帶

上樣量偏少

加大上樣量

轉(zhuǎn)膜不充分

參照儀器使用說明書,優(yōu)化轉(zhuǎn)膜條件,或使用蛋白預(yù)染 Maker判斷轉(zhuǎn)膜效果

檢測系統(tǒng)所用試劑失效

確認使用的檢測試劑正常工作,優(yōu)化一抗、二抗及檢測底物的反應(yīng)條件(濃度、溫度、時間)

抗體沒有有效結(jié)合 ECL發(fā)光 Marker

不同來源的抗體及其亞型與 ECL發(fā)光 Marker的結(jié)合效果差異明顯,請根據(jù)實驗具體情況加以選擇

條帶過亮呈彌散狀,甚至無法區(qū)分條帶

ECL發(fā)光 Marker上樣量偏多

減少上樣量

抗體濃度過高

降低一抗、二抗使用濃度,優(yōu)化抗體反應(yīng)條件

 


 
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