1×TBST粉末型
1×Tris-buffered Saline Tween（Power）
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產(chǎn)品編號
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產(chǎn)品名稱
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規(guī)格
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TB5070P
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1×TBST粉末型
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10×1L
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簡介：
TBST為白色至類白色速溶顆粒，每袋TBS-T速溶顆?？膳渲?L
1×
TBS-T緩沖液，操作簡便，使用方便。TBS-T的主要成分是氯化鈉、氯化鉀、Tris緩沖鹽和Tween-20，1×
TBST緩沖液中含有的氯化鈉濃度為137
mM、氯化鉀的濃度為2.7
mM，Tris緩沖鹽的濃度為25
mM，Tween-20的含量為0.05%。
TBST是一種在生物學(xué)上應(yīng)用廣泛的緩沖液，主要用于免疫組化、原位雜交、酶聯(lián)免疫、免疫印跡實(shí)驗(yàn)中，常用作洗滌緩沖液，也常用于抗體的稀釋以及封閉液的配制。
使用方法
1. 量取約600 ml的蒸餾水加入燒杯，并放置一個(gè)磁性攪拌子于燒杯中。
2. 將燒杯置于磁力攪拌器上，慢慢加入1袋TBS-T速溶顆粒的全部內(nèi)容物，攪拌溶液直至完全溶解。
3. 向步驟2的TBST溶液中加入蒸餾水，定容至1 L，即為1×。
保存條件：
常溫保存。
Western blot的洗液TBST是實(shí)驗(yàn)室常用的配制液體，對于TBST的配方也基本上相差不多，其中配方中就有一種組分是Tween-20，一種黃色或琥珀色澄明的油狀液體，具有特殊的臭氣和微弱苦味。用移液槍吸取時(shí)會有一種滯后感。為什么在Western blot的洗液TBST中要加入這么一種試劑，Tween-20在Western blot 中在發(fā)揮什么樣的作用呢？
1、Tween-20
首先了解一下什么是Tween-20。Tween-20也寫作Tween 20，也稱Polyethylene glycol sorbitan monolaurate，中文名為吐溫-20或吐溫20。Tween-20為黃色或琥珀色澄明的油狀液體，具有特殊的臭氣和微弱苦味。分子中含有較多的親水性基團(tuán)，可與水、甲醇、乙醇、異丙醇、丙二醇、乙二醇、棉子油等混溶。是常用的非離子性去垢劑。
2、Tween-20的應(yīng)用
Tween-20是一種非離子型表面活性劑。用途為水包油乳化劑、可用作溶劑、擴(kuò)散劑、穩(wěn)定劑、潤滑劑和抗靜電劑等。氣相色譜固定液(最高使用溫度120℃)分離分析揮發(fā)油、脂肪酸酯、醇、酮和鹵化物。
3、Tween-20作用
Western blot的操作流程中大部分都用到TBST洗液，而且還是封閉，一抗二抗孵育這種比較關(guān)鍵的步驟。通常Tween-20作為一種非離子型表面活性劑，效果和SDS、BSA作用差不多，主要是封閉膜上蛋白的非結(jié)合位點(diǎn)，以降低背景，增強(qiáng)抗體的特異性結(jié)合。理想的封閉劑應(yīng)該封閉所有未結(jié)合位點(diǎn)而不替換膜上的靶蛋白、不結(jié)合靶蛋白的表位、也不與抗體或檢測試劑有交叉反應(yīng)。如果脫脂牛奶封閉效果不好可以提高吐溫濃度。
在WB洗液里的吐溫是和BSA一樣，對抗原抗體蛋白提供保護(hù)作用，同時(shí)因?yàn)槭潜砻婊钚詣ㄋ颈P加成親水的環(huán)氧乙烷基團(tuán)后的化合物），可以減少抗體對抗原的非特異性作用，用于洗脫未結(jié)合的抗體、減少非特異性結(jié)合。Tween-20是我們用TBST的時(shí)候Tween-20得用量是0.5ml/L，不加SDS。
引用TBST發(fā)表文章
1. [2022 IF=6.9] Galactinol synthase 2
infuences the metabolism of chlorophyll, carotenoids, and ethylene in tomato
fruits.
Author: Huidong Zhang, Kunpeng Zhang, Xueya Zhao, Mengxi Bi,
Yudong Liu, Shuo Wang, Yi He，Kui Ma, Mingfang Qi
Product：TB5070P 1×TBST 粉末型
Journal: Journal of Experimental Botany Published:
15 March 2024
Institution：College of Horticulture, Shenyang
Agricultural University
Paper link： https://doi.org/10.1093/jxb/erae121